宫康舒胶囊由熟大黄、生地黄、白芍、黄芩、墨旱莲、土鳖虫、水蛭、桃仁、女贞子、甘草等药组成。具有活血逐瘀，养阴清热，软坚散结的功效。用于子宫肌瘤辨证属血瘀兼阴虚火旺证的患者。根据处方中药物的性质、文献资料中药物的现代药理学研究[1]、药效学实验筛选结果，同时结合生产的可行性及生产设备等多方面的因素来制订提取工艺路线。通过药理药效学实验研究确认复方中的动物药与植物药混提为好。

处方中君药大黄主要有效成分为蒽醌衍生物，其中以蒽苷为主，极性较大，易溶于甲醇及乙醇，也能溶于水，在热水中更能溶解。地黄中主要含环烯醚萜苷类、低聚糖、多糖[2]等，易溶于乙醇、水。土鳖虫及水蛭含有大量的氨基酸，水蛭中水蛭素是一种多肽，它们均溶于水、乙醇。桃仁主含脂质体、甾体、氨基酸、黄酮及其糖苷类化合物[2]等，易溶于水、乙醇。墨旱莲全草含多种噻吩类化合物，叶中含多种内酯;女贞子中多糖为其主要有效成分，易溶于水。黄芩含黄酮类，其中以黄芩苷元、黄芩苷[5]为主要有效成分。方中绝大部分药物的主要有效成分都溶于水，因此采用水提法，并经精制除杂、在提取物中加适量辅料等工艺过程，精制成口服胶囊。

我们通过正交试验优选最佳水提工艺。

1 仪器与材料

1.1 仪器高效液相色谱仪：岛津LC-10AT，C-R6A数据处理机，SPD-10A紫外可见波长检测器，7725手动进样器，MILILIQ纯水器。754型紫外可见分光光度计(上海光谱仪器有限公司)。

1.2 药材购于成都市药材公司，经成都中医药大学中药鉴定教研室吴启南教授鉴定合格可用。

1.3大黄素(110756-200110，供含量测定用)对照品(由中国药品生物制品检定所提供)。宫康舒胶囊(批号060701、060702、060703，由成都华宇制药有限公司提供)。

1.4 试剂甲醇为色谱纯、三蒸水(自制)，其它均为分析纯。其他试剂均为分析纯。

1. 5 ZTC1+1-Ⅱ型澄清剂(购自北京正天成澄清技术有限公司)

2 方法

2.1 提取工艺条件的筛选

2.1.1 前处理

本试验研究所用药材均属药典规定品种。根据处方要求进行净制，切制。

3 熟大黄：取熟大黄块，切厚片。

4 生地黄：取生地黄，切段。

5 桃仁：取桃仁，捣碎。

6 黄芩：取黄芩，切段。

7 甘草：取甘草，切段。

2.1.2 提取工艺条件考察

根据处方中药物的性质和现代药理学研究，及药效实验结果，采用水煎煮法提取。影响水提因素有：浸泡时间(A)、加水量(B)、煎煮时间(C)、煎煮次数(D)。上述四个因素，各取3个水平，进行L9(34)正交实验。以浸膏得率(%)、大黄总蒽醌含量(%)、总氨基酸含量(%)为评价指标，进行综合评价，筛选出最佳提取工艺。表头设计及试验结果见表1、表2、表3。

样品制备：取2倍处方量药材，按正交试验表进行提取，滤过，滤液浓缩定容至200ml。

浸膏得率测定：精密量取上述样品液各10ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3小时，移置干燥器中，冷却30分钟，迅速精密称定重量，计算浸膏得率，结果见表2。

总蒽醌的含量测定：采用紫外分光光度法[4-5]。

1，8-二羟基蒽醌(110756-200110)对照品溶液的配制：精密称取105℃干燥至恒重的1，8-二羟基蒽醌5mg，置25ml量瓶中，用无水乙醚溶解并稀释至刻度，摇匀;精密量取溶液5ml，置50ml量瓶中，加乙醚至刻度，摇匀，即得20μl/ml的对照品溶液。

标准曲线的制备：精密量取对照品溶液2.0，3.0，4.0，5.0，6.0ml，分别置于干燥具塞试管中，水浴蒸去乙醚，加5%NaOH-2%NH4OH混合碱液8.0ml，摇匀，放置30min，照分光光度法(《中国药典》2005年版一部附录V)试验，以混合碱液为空白，于535nm处测定吸收度，计算回归方程，见图2-1。

A=0.0424X+0.0082(r=0.9995) 线性范围：5～15μg

测定法：精密量取上述各样品溶液1.5ml，分别置干燥试管中，加蒸馏水1.0ml，40%FeCl3水溶液0.5ml，沸水浴上加热20min，再加入HCl0.2ml，再于沸水浴上加热水解30min，并不断振摇，完毕立即用流水冷却至室温，倾入分液漏斗中，加乙醚10ml、5.0ml萃取2次，萃取液合并，用5%NaOH-2%NH4OH混合碱液萃取2次(5.0，3.0ml)，滤过，将混合碱萃取液合并于10ml具塞刻度试管中，沸水浴上加热4min驱醚，用流水冷却至室温，补加氨水至原体积，摇匀，放置30min，以混合碱液为空白，于535nm处测定吸收度，计算，即得。结果见表2。

总氨基酸含量测定：采用氨基酸自动分析仪进行测定[6]。

分析仪器：日立835-50型氨基酸分析仪。

主要色谱条件：色谱柱采用日立2619阳离子交换树脂，内径2.6mm，长150 mm，洗脱方式为4段梯度洗脱，由计算机控制。柠檬酸缓冲液为洗脱液，流速0.225ml/min，泵压110-120kg/cm2，茚三酮为显色剂，显色剂溶液流速0.3 ml/min，泵压30-40 kg/cm2,以570nm和440nm波长同时检出，色谱柱温度51℃，反应浴温度98℃，反应圈内径0.25mm，长20m，样品分析周期74min;进样体积50μl。18种氨基酸混合标样色谱分析图见附图1。

主要技术指标：最小检出量：10-10克分子/50μl，定量测定重现性RSD<2.5%。

测定法：精密量取上述各样品溶液2ml，水浴蒸干，加6NHCl110℃水解24h，过滤，滤液水浴蒸干，溶解，定容至50ml。精密量取50μl，进样，计算。结果见表2。